安捷倫1260液相色譜儀是一種高效的分離和分析技術(shù),通過在固定相(色譜柱)和流動(dòng)相(溶劑)之間相互作用,實(shí)現(xiàn)對(duì)混合物中成分的分離和檢測。HPLC在各種領(lǐng)域的科學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮著重要作用。其基本原理是利用化合物在固定相(通常是填充在色譜柱中的吸附劑)和流動(dòng)相(溶劑)之間的分配系數(shù)差異,實(shí)現(xiàn)化合物的分離。樣品混合物在色譜柱中受到不同程度的吸附和解吸作用,從而在柱中分離成各個(gè)成分。檢測器檢測這些分離的化合物,并生成相應(yīng)的信號(hào)。
1、儲(chǔ)液器
儲(chǔ)存流動(dòng)相:儲(chǔ)液器用于存儲(chǔ)足夠數(shù)量的流動(dòng)相,以確保整個(gè)分析過程中供應(yīng)充足。儲(chǔ)液器一般配有溶劑過濾器,以防止流動(dòng)相中的顆粒進(jìn)入泵內(nèi)。
防止氣泡:在儲(chǔ)液器中,流動(dòng)相需經(jīng)過脫氣處理,防止氣泡進(jìn)入系統(tǒng)引起噪聲,影響檢測結(jié)果。
2、泵
輸送流動(dòng)相:輸液泵將儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相連續(xù)不斷地以高壓形式輸入液路系統(tǒng),使樣品在色譜柱中完成分離過程。
調(diào)節(jié)流速穩(wěn)定性:高壓泵的壓強(qiáng)通常為1.47~4.4×10^7^Pa,流速可調(diào)且穩(wěn)定,有助于降低樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng),加快其在柱中的移動(dòng)速度,從而提升分辨率。
梯度洗脫裝置:在某些應(yīng)用中,通過逐漸改變流動(dòng)相的組成來增加洗脫能力,從而提高分離效果。
3、進(jìn)樣器
裝載樣品:進(jìn)樣器是將樣品送入色譜柱的裝置,進(jìn)樣方式可以分為閥進(jìn)樣或自動(dòng)進(jìn)樣。比較常用的是采用自動(dòng)進(jìn)樣器裝樣。
保證重復(fù)性:進(jìn)樣量恒定,這對(duì)提高分析樣品的重復(fù)性有益。
4、色譜柱
分離核心:色譜柱是整個(gè)色譜系統(tǒng)的心臟,其質(zhì)量直接影響到分離效果。色譜柱內(nèi)填充有固定相,樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中做相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出。
材料種類:色譜柱的材料可以是優(yōu)質(zhì)不銹鋼、厚壁玻璃管或鈦合金等,柱子的長度和內(nèi)徑根據(jù)具體需求選擇,填料材料如硅膠或氧化鋁等。
5、檢測器
轉(zhuǎn)換信號(hào):檢測器將色譜柱連續(xù)流出的樣品組分轉(zhuǎn)變成易于測量的電信號(hào),被數(shù)據(jù)系統(tǒng)接收,得到樣品分離的色譜圖。
類型多樣:常用的檢測器包括紫外檢測器、熒光檢測器、示差折光檢測器和電化學(xué)檢測器等,根據(jù)樣品特性選擇合適的檢測器。
6、記錄儀
數(shù)據(jù)輸出:記錄儀或數(shù)據(jù)工作站接收檢測器傳來的電信號(hào),轉(zhuǎn)換成圖譜形式打印出來,供后續(xù)數(shù)據(jù)分析。
現(xiàn)代數(shù)據(jù)處理:現(xiàn)代HPLC設(shè)備多采用計(jì)算機(jī)軟件作為數(shù)據(jù)處理與記錄系統(tǒng),可以實(shí)時(shí)監(jiān)控和處理色譜數(shù)據(jù),提高了分析的準(zhǔn)確性和便捷性。